PCR（polymerase chain reaction）法

　特定の遺伝子を増やす方法で、よくテレビのサスペンスなどで、たった数本の髪の毛やほんの少しの肉片から遺伝子検査を行い犯人などを特定しています。

DNAが加熱により2本鎖から1本鎖に解離し、冷却することで2本 鎖に戻ることを利用し、1本鎖DNAを鋳型として目的のプライマー を結合させ、DNAポリメラーゼの転写反応によりDNA合成を行う ことを繰り返し、目的とするDNA領域を指数関数的に増幅させる方 法。

　１９８５年に Kary B. Mullis が、高温でも耐えられる耐熱性ポリメラ ーという酵素を発見し、この酵素を用いてＤＮＡを増幅するＰＣＲ法を 発明したのです。（１９９３年にノーベル賞を受賞）
ＰＣＲ法を行う機械がサーマルサイクラー（ＤＮＡ増幅装置）です。

　●　ＰＣＲ法

　ＰＣＲ法はＲＮＡも用いますが、今回はＤＮＡを対象に説明します。
ＤＮＡは、２本鎖の安定なはしごの様に塩基が結合しています。 このＤＮＡに９０℃以上の熱を加えると塩基の結合が離れて１本ずつ になります。
この時点で、それぞれに２本に分かれた１本鎖のＤＮＡのある特定の 塩基配列に結合する短い塩基配列のプライマーという２０個ほどの ＤＮＡ断片のようなものを結合させます。
分かれた１本鎖のＤＮＡにそれぞれ結合するプライマーはある一定の 温度で結合を始めます。
この反応はアニーリングと言ってプライマーに含まれている塩基の種類 によって反応温度が異なりますが、通常５５〜６０℃で結合します。
この時、それぞれのプライマーは前もって調べたいＤＮＡの特定遺伝子 範囲を挟み込むように塩基配列を決定し、センスプライマー、アンチプラ イマーの２種類のプライマーを作成します。
そして、この２種類のプライマーはポリメラーゼと言う酵素により７２℃で 反応し、次々と反応液中の塩基を取り込んで伸びてゆきます。 これをＰＣＲにおいて伸長と言います。
熱変性（９４℃）→アニーリング（５５〜６０℃）→伸長（７２℃）の１サイクル で１本のＤＮＡは２本のＤＮＡになります。 つまり１サイクルでＤＮＡは２倍に増幅します。1サイクルごとに、Ｎの2乗ずつ 増幅します。PCR法を用いれば、たった20サイクルでなんと約１００万倍にも なるのです。

　●　RT-PCR(Reverse transcriptase-polymerase chain reaction)

RNAが増幅対象の場合に、RNAを鋳型として逆転写酵素（reverse transcriptase:RT）により相補的なcDNAを合成してPCRを行う方法

　⇒　遺伝子検査